Анализ кала на токсины а и в клостридий диффициле

Специальной диеты не требуется.

Накануне исследования исключить ректальное применение каких-либо лекарственных средств, а также препаратов, влияющих на перистальтику кишечника (слабительные, ферменты, симпатомиметики).

Правила взятия биоматериала

Кал собирается после естественной дефекации на чистый лист бумаги или в чистую ёмкость (ёмкость предварительно вымыть с мылом, ополоснуть кипятком и высушить). Нельзя отбирать пробу из унитаза. Затем одноразовой лопаточкой забирают небольшое количество кала из разных мест (4-5 раз) в контейнер.

При сборе кала (особенно с подгузника), следует избегать примеси мочи и выделений из половых органов.

Доставка в лабораторию в день взятия биоматериала.

Метод исследования: иммунохроматографический экспресс-тест

Clostridium difficile (C. difficile) — облигатно-анаэробная, грамположительная, спорообразующая, цитотоксинпродуцирующая палочка. C. difficile – это один из наиболее распространенных патогенов и частая причина внутрибольничных инфекций в стационарах различного профиля. C. difficile является основным этиологическим фактором антибиотико-ассоциированной диареи и псевдомембранозного колита. Основной путь передачи инфекции — фекально-оральный. Существуют две формы жизни C. difficile — неактивная (споры) и активная (вегетативная). Споры бактерии могут выживать в неблагоприятной внешней среде, а также при применении распространенных методов стерилизации — высоких температур, химических веществ, ультрафиолетового облучения. Кроме того, споры устойчивы к воздействию антибиотиков, могут длительное время сохраняться в желудочно-кишечном тракте человека и в дальнейшем привести к рецидиву заболевания. Колонизация кишечника C. difficile характерна для 2% здорового взрослого населения и до 50% детей в возрасте до 2 лет. Основными факторами вирулентности C. difficile служат токсины А (TcdA) и В (TcdB) (белковые молекулы, относящиеся к гликозилтрансферазам), продуцирующиеся не всеми штаммами C. difficile. Таким образом, именно выявление токсинов (токсина А и токсина В) в кале больных с диареей имеет большую диагностическую значимость по сравнению с выделением культур бактерий. Токсин А (энтеротоксин) вызывает дисфункцию клеток эпителия кишечника, токсин В (цитотоксин) имеет выраженный цитопатологический эффект. Выявление токсинов А и В происходит при наличии активной (вегетативной) формы бактерий в период клинических проявлений.

Аналитическая чувствительность теста на выявление токсина А — 4 нг/мл, токсина В — 5 нг/мл. Относительная чувствительность — 86, 7% относительная специфичность — 91, 7%.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

  • Первичная диагностика инфекции;
  • Оценка эффективности терапии.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Подготовка к исследованию:
Параметр Референсные значения
Клостридиум диффициле (Clostridium difficile), качественное определение токсина A Не обнаружено
Клостридиум диффициле (Clostridium difficile), качественное определение токсина B Не обнаружено

Интерпретация проводится врачом с учетом клинических проявлений.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2020

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Clostridium difficile — бактерия, которая вызывает инфекционную диарею и псевдомембранозный колит. Чаще заражаются пациенты старшего возраста, пребывающие на лечении в стационаре и принимающие антибиотики. Под влиянием возрастных факторов, сопутствующих заболеваний и изменения микрофлоры кишечника в результате воздействия антибиотиков у таких пациентов снижается иммунитет к C. difficile. По этим причинам в больницах и учреждениях долгосрочного ухода могут наблюдаться эпидемические вспышки инфекции C. difficile. Также в последнее время появились гипервирулентные штаммы бактерии, поражающие молодых людей со здоровым иммунитетом.

Возбудитель селится в толстом кишечнике. Некоторые штаммы никак себя не проявляют, другие же выделяют токсины, вызывающие заболевания ЖКТ. Существует два типа токсинов — А и В. Токсин В присутствует во всех патогенных штаммах бактерии, токсин А — лишь в некоторых. Оба токсина вызывают гибель клеток кишечника, воспалительный процесс и повреждение тканей, что ведет к диарее и колиту. Токсин А в большей степени энтеротоксичен (провоцирует воспалительный процесс и повреждение слизистой оболочки кишечника), а токсин В — цитотоксичен (вызывает гибель клеток). Также известен бинарный токсин, увеличивающий патогенность возбудителя.

В норме местная микрофлора кишечника защищает организм от C. difficile, однако под воздействием антибиотиков защитные бактерии гибнут, открывая путь для инфекции.

Заражение C. difficile может протекать как бессимптомно, так и в острой форме, для которой характерна тяжелая диарея, анорексия, тошнота, лейкоцитоз. При тяжелом течении болезни отмечают снижение уровня общего белка и альбумина в крови.

Диагностика инфекции включает анализ кала на токсины клостридий, а также бактериальный посев (культуральное исследование). Посев считают менее специфичным, так как есть штаммы С. difficile, которые не продуцируют токсины.

В каких случаях обычно назначают исследование

Анализ на токсины клостридий назначают при следующих состояниях:

  • диарея у пациентов, принимающих или проходивших курс антибиотиков (особенно после клиндамицина, линкомицина, синтетических пенициллинов, цефалоспоринов), а также диарея у поступивших в стационар спустя 72 часа после госпитализации;
  • подозрение на псевдомембранозный колит у пациентов, относящихся к группе высокого риска: старше 65 лет, длительная госпитализация, проведение хирургических операций, наличие злокачественных опухолей, почечная недостаточность, воспалительные заболевания толстой кишки, химиотерапия, гипоальбуминемия.

Что именно определяют в процессе анализа

Выявляют наличие токсинов А и В в кале пациента методом иммунохроматографического анализа.

Что означают результаты теста

В норме результат должен быть отрицательным. При обнаружении токсинов следует проконсультироваться с лечащим врачом по поводу дальнейшей терапии.

Сроки выполнения теста

Результат исследования можно получить через 1–2 дня после сдачи анализа.

Подготовка к анализу

Кал пациент собирает дома. Целесообразно исследовать кал только при наличии жидкого стула (10–15 мл водянистых испражнений), образцы оформленного стула исследовать нецелесообразно.

Clostridium difficile – это анаэробная грамположительная бацилла, которая является основной причиной антибиотико-ассоциированной диареи и псевдомембранозного колита в лечебных учреждениях.

Продуцируемый бактерией C. difficile специфический энтеротоксин (токсин А) повреждает слизистую оболочку кишечника, вызывает развитие воспалительного процесса в ней, усиливает секрецию жидкости.

Антигены бактерий в кале, Клостридиум диффициле.

The definition of toxin A Clostridium difficile.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Clostridium difficile (C. difficile) – это анаэробная, грамположительная спорообразующая бактерия, которая вызывает инфекционную диарею и псевдомембранозный колит. Чаще всего подвержены заражению C. difficile пациенты старше 65 лет, находящиеся на стационарном лечении и получающие антибактериальную терапию (или после курса антибактериальной терапии). У данных пациентов наблюдается снижение иммунитета к C. difficile вследствие возрастного компонента, наличия сопутствующих заболеваний, а также изменения микрофлоры кишечника после воздействия антибиотиков. Большинство эпидемий возникают в условиях стационара и в учреждениях долгосрочного ухода. С появлением гипервирулентных штаммов C. difficile стали нередкими случаи заражения молодых пациентов с неизменённым иммунитетом.

C. difficile у людей колонизирует толстый кишечник. Существуют как токсигенные, так и нетоксичные штаммы, но только токсигенные вызывают заболевания у людей. Патогенность зависит от наличия одного или двух, вызывающих диарею, токсинов: токсина А и токсина В. Все токсигенные штаммы содержат токсин В, совместно с токсином А или без него. Оба токсина ведут к гибели клеток кишечника, стимулируют воспалительную реакцию, которая усугубляет повреждение тканей, вызывает диарею и псевдомембранозный колит. Существует также третий – бинарный токсин, который повышает вирулентность C. difficile.

Способность C. difficile вызывать воспаление кишечника основывается на двух факторах: высокая способность к колонизации и иммунный ответ пациента. Толстый кишечник защищен местной флорой, состоящей из 4000 видов бактерий, которые в совокупности обеспечивают устойчивость к колонизации патогенных видов путем конкуренции за основные питательные вещества и места прикрепления к стенке кишечника. Антибиотики нарушают барьерную микрофлору и уменьшают защиту от колонизации патогенных микроорганизмов.

Клинические проявления заражения C. difficile варьируются в широком спектре: от бессимптомного состояния носителя до токсического мегаколона. Типичные признаки и симптомы острой инфекции включают диарею (более 3 раз неоформленного стула в сутки), анорексию, тошноту; в общем анализе крови лейкоцитоз. Тяжелое течение характеризуется гипоальбуминемией, высоким лейкоцитозом в крови.

Лабораторная и инструментальная диагностика клостридиальной инфекции осуществляется несколькими способами. Наиболее широко распространенным является иммуноферментный анализ с определением токсина А и токсина В Clostridium difficile в кале. Чувствительность метода составляет 75-95 %, специфичность 83-98 %. Из других методов можно отметить полимеразную цепную реакцию для токсигенного штамма C. difficile, исследование глутаматдегидрогеназы C. difficile, колоноскопию (с выявлением картины псевдомембранозного колита), морфологическую диагностику (гистологическое исследование биоптатов кишечника), посев на C. difficile.

Когда назначается исследование?

  • Развитие диареи у пациентов, получавших антибиотики в предшествующие 2 месяца, а также диареи, развившейся спустя 72 часа после госпитализации;
  • при подозрении на псевдомембранозный колит у пациентов, относящихся к группе высокого риска: возраст старше 65 лет, длительная госпитализация (особенно пребывание в ОРИТ), оперативные вмешательства, наличие злокачественных опухолей, почечной недостаточности, воспалительные заболевания толстой кишки, химиотерапия, прием ингибиторов протонной помпы, гипоальбуминемия, энтеральное питание, ишемия кишки;
  • наиболее часто С. difficile – ассоциированный колит развивается после применения клиндамицина или линкомицина (до 6 %), полусинтетических пенициллинов (5-9 %), цефалоспоринов с широким спектром действия.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательный результат.

Как и при всех диагностических процедурах in vitro, результаты теста должны интерпретироваться только с учетом общей клинической картины и других методов диагностики.

Отрицательный результат теста не исключает заражения C. difficile, он может быть обусловлен протеолитическим разложением токсинов из-за неправильного хранения пробы. При подозрении на инфекцию следует повторить исследование – протестировать другую пробу кала.

Положительный результат теста не исключает присутствия других патогенов.

Присутствие в пробах кала значительных количеств крови может в ряде случаев привести к ложноположительным результатам.

  • Тест не должен применяться в следующих ситуациях:
    • у детей в возрасте до 1 года в связи с высоким процентом ложноположительных результатов в данной возрастной группе;
    • для контроля эффективности лечения, так как у некоторых пациентов еще длительное время после клинического выздоровления в кале обнаруживается токсин C. difficile.
  • Через неделю с момента заражения число паразитов в фекалиях снижается, что приводит к снижению чувствительности теста. Образцы кала для анализа должны быть собраны в течение одной недели с момента появления симптомов заболевания.

53 Анализ кала на яйца и личинки гельминтов, простейшие и их цисты (Parasep)

Литература

  • Burke KE, Lamont JT. Clostridium difficile infection: a worldwide disease. / Gut Liver. 2014 Jan;8(1):1-6.
  • Ardeshir Rineh, Michael J Kelso, Fatma Vatansever, George P Tegos, Michael R Hamblin. Clostridium difficile infection: molecular pathogenesis and novel therapeutics. / Expert Rev Anti Infect Ther. 2014 Jan; 12(1): 131–150.
  • Ивашкин В.Т., Ющук Н.Д., Маев И.В., Лапина Т.Л., Полуэктова Е.А., Шифрин О.С., Тертычный А.С., Трухманов А.С., Шептулин А.А., Баранская Е.К., Ляшенко О.С., Ивашкин К.В. Рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению Clostridiumdifficile-ассоциированной болезни. / Российский Журнал Гастроэнтерологии, Гепатологии, Колопроктологии. 2016;26(5):56-65.

Читайте также:
Читайте также:  Колоноскопия кишечника подготовка к процедуре в домашних условиях
Adblock
detector