Ифа кала на хеликобактер

Helicobacter pylori – это бактерия, в норме живущая в желудочно-кишечном тракте у многих людей. При благоприятных условиях колонии хеликобактер пилори увеличиваются, вызывая патологии желудка и кишечника. Перед тем, как назначить курс лечения, врач должен убедиться в наличии патогенных микроорганизмов в ЖКТ, уточнить уровень их концентрации.

Анализ на хеликобактер пилори назначается при болезненных ощущениях и дискомфорте в области желудка перед приемом пищи. Хеликобактериоз провоцирует развитие серьезных поражений слизистых оболочек. Своевременное обнаружение инфекции и её ликвидация позволяют избежать развития серьезнейших раковых образований и других нарушений здоровья.

Данный анализ даёт общее представление о возбудителе инфекции, поскольку на сегодняшний день считается одним из самых точных. Представленные спиралевидные микроорганизмы обитают зачастую в нижнем отделе желудка, а также в двенадцатиперстной кишке. Такие анаэробные микробы мгновенно погибают на воздухе. Зачастую заболевание передается от инфицированного человека к здоровому через слизь и слюну, а также бытовым путем. Попав в новый организм, бактерии спускаются непосредственно в желудок.

Содержащаяся в желудке соляная кислота такой вид микроорганизмов не уничтожает. Бактерии зарываются в слизистые оболочки желудка, без труда нарушая структуру тканей, что приводит к неполноценному функционированию. Такая потенциальная опасность вызывает серьезные воспалительные процессы, эрозии и язвы. Помимо этого хеликобактер пилори способны изменять местную кислотность желудка.

Данные микроорганизмы легко распространяются по всему желудку при ослабленном иммунитете человека и при длительном существовании.

Своевременная диагностика позволяет избежать многих опасных последствий. При любых симптомах желудочного недомогания специалист назначит анализ на хеликобактер пилори. Многие пациенты жалуются на проблемы в системе пищеварения. К ним можно отнести повторяющиеся острые боли в области желудка, появление изжоги, ощущение тяжести и неприятие мясной жирной пищи. Как правило, при хеликобактериозе сильные боли проходят сразу же после приема пищи.

Показания к сдаче анализа

Сложно представить, чтобы человек, не имеющий симптомов заболевания, отправился на полномасштабное обследование без всякой необходимости.

Симптомы, предрасполагающие к сдаче анализов на Helicobacter pylori:

Гастралгия (боль в желудке и кишечнике) различной интенсивности. Появляются во время еды или после нее, вызваны дефицитом ферментов и нарушением переваривания пищи и ее застоем в желудке.

Интенсивная изжога. Возникает из-за обратного заброса агрессивного желудочного сока в не предназначенный для этого пищевод, при частых повторениях является симптомом патологии.

Чувство тяжести, возникающее даже после приема минимальных порций еды. У больного возникает ощущение переполненного желудка.

Частая тошнота, не вызванная объективными причинами (например, токсикозом беременности).

Сочетание боли в желудке с рвотой и отсутствием возможности есть и пить.

Небольшой дискомфорт в проекции желудка, ухудшение аппетита, легкая тяжесть. Часто проявляются на начальной стадии хелиобактериоза.

Наличие слизи в кале.

Любой из этих симптомов – повод для немедленного обращения к врачу для обследования и лечения.

Подготовка к анализу

Для получения объективных показателей нужно тщательно готовиться к сдаче анализов на Helicobacter pylori.

Необходимые подготовительные мероприятия:

Полный отказ от курения за сутки до сдачи анализов. Никотин негативно влияет на слизистую желудка, искажая результаты анализов.

Полный отказ от спиртного. Причина та же.

Запрет на употребление чая и кофе, негативно влияющих на состояние ЖКТ.

Временное ограничение на прием пищи в течение 8 часов до анализа.

Поскольку кровь для анализа на хеликобактер берется из вены на голодный желудок, можно взять с собой в поликлинику немного еды и воду.

Виды анализов и диагностик

Для изучения состояния организма существует несколько методик. Каждая из них имеет свои особенности.

Иммуноферментный анализ назначают, чтобы оценить уровень концентрации антител к хеликобактер пилори в крови пациента. Если в крови имеются антитела к бактерии, значит, иммунитет выработал их не менее 1-2 недель назад. Если реакция организма еще не сформирована, возможен ложноотрицательный результат.

Причины ложноположительных результатов:

ошибка лаборанта, проводившего исследование;

недостаточно времени прошло после эрадикции, так как антитела находятся в крови спустя некоторое время после полного излечения.

Положительный результат ИФА свидетельствует о необходимости полного обследования, изучения результатов расширенного анализа крови, дающего больше информации о состоянии организма.

В организме человека при проникновении в него инфекций или патогенных микроорганизмов вырабатываются иммуноглобулины – белки клеток крови, противостоящие чужеродным вирусам. При заражении хелиобактериозом организм человека вырабатывает иммуноглобулины LgG, LgM, LgA, активно противостоящие Helicobacter pylori. При их обнаружении в крови человека следует делать вывод о том, что он болен хелиобактериозом.

Особенность иммуноглобулинов состоит в том, что в погоне за патогенными клетками они настигают их в любом месте организма человека. Эти белки вырабатываются после освоения бактериями желудочно-кишечного тракта.

Пониженный или отрицательный уровень содержания иммуноглобулина LgG говорит об одном из следующих вариантов: бактерия отсутствует в организме и вероятность развития язвенной болезни низка, или с момента заражения прошло всего 3-4 недели. При болях в ЖКТ нужно через неделю повторить обследование.

Повышенный или положительный уровень иммуноглобулина LgG говорит об одном из двух вариантах: бактерия присутствует в организме, повышая риск развития рака и язвы желудка, или человек совсем недавно вылечился от хелиобактериоза.

Пониженный уровень содержания иммуноглобулина LgM, обычно обнаруживаемый сразу же после инфицирования, или его отсутствие, совершенно точно говорит об отсутствии бактерий, так как этот белок обнаруживается в ранний период после заражения.

Повышение уровня LgM свидетельствует о том, что ЖКТ находится на ранней стадии инфицирования, и он почти не поврежден инфекцией.

Читайте также:  Суппозитории ректальные облепиховое масло инструкция

Результаты исследования полимеразной цепной реакции могут зафиксировать в крови образцы ДНК Helicobacter pylori, что ставит ПЦР-тест на первое место среди всех методов диагностики. Положительный результат теста доказывает наличие бактерии в организме, отрицательный – ее отсутствие. Единственное, что недоступно при выполнении анализ крови на ПЦР – определение времени внедрения бактерии в организм.

Если перед взятием крови на анализ проводилась антибактериальная терапия, или лечение антисептиками, результаты исследования не будут объективными. Расшифровку анализов крови лучше доверить специалисту, хотя серьезные лаборатории вкладывают в результаты таблицу нормы и отклонений от нее.

При выполнении этого тестирования во время проведения эндоскопии берут мазки со слизистой антрального отдела желудка. Область взятия мазка – места отека и гиперемии, но не эрозии и не язвы. После взятия отпечатков врач-лаборант высушивает и окрашивает мазки.

При исследовании под микроскопом можно обнаружить Helicobacter pylori в виде спирали или в виде крыльев летящей чайки.

Референсные значения цитологии:

(+) — слабый уровень обсемененности (до 20 микробных тел);

(++) – средний уровень (до 40 микробных тел);

(+++) – высокий уровень (свыше 40 микробных тел при 360-кратном увеличении).

Дополнительно при наличии воспаления выявляют клеточный инфильтрат: (эозинофилия, нейтрофилия, лимфоциты, плазматические клетки). Дополнительно можно обнаружить дисплазию, пролиферацию, метаплазию, злокачественные новообразования.

Исследование выполняется после взятия биоптата слизистой во время эндоскопии. Его помещают в гель-носитель, содержащий мочевину, индикатор pH, бактериостатический агент. Выводы делают на основании перемены цвета биоптата в диапазоне от желтого оттенка до малинового цвета.

Малиновая окраска появилась в первый час – выраженная инфекция (+++);

В первые 2 часа – умеренный уровень инфицирования (++);

К концу суток – незначительный уровень инфекции (+);

В более поздние сроки – норма или отрицательный результат.

При слабом уровне инфицирования может быть зафиксирован ложноотрицательный результат. Для повышения достоверности его сочетают с гистологическим методом.

При проведении этого тестирования нужно взять натощак фоновые пробы выдыхаемого воздуха. После легкого завтрака в виде сока или молока обследуемый выпивает водный раствор мочевины, меченой 13C, так называемый тестовый раствор. Затем через каждые 15 минут производят забор 4 финальных проб.

Анализ теста на основании наличия стабилизированного изотопа при использовании масс-спектрометра:

Легкая степень инфицирования – менее 3,5%;

Средняя степень – 3,5-6,4%;

Тяжелая степень – 6,5-9,4%;

Очень тяжелая степень – свыше 9,5%.

Норма Helicobacter pylori при уреазном тесте – 1%.

Анализ основан на определении титра антител – иммуноглобулинов класса G. В норме они при попадании хеликобактер в организм связывают микроорганизмы, останавливая их болезнетворное влияние. Исследование проводится методом иммуноферментного анализа после взятия крови из вены в стерильную пробирку. Перед исследованием нельзя есть на протяжении 8 часов, пить кофе и алкоголь, курить. Для изучения динамики анализ проводят на протяжении всего периода лечения.

Расшифровка результатов анализа

Несмотря на то, что расшифровку показателей нужно доверить врачу, направившему на обследование, все пациенты хотят самостоятельно узнать свои результаты.

Сколько норма хеликобактер пилори? Норма содержания бактерий при тестировании венозной крови:

Антитела IgG к хеликобактер пилори

Метод основан на том, что после попадания в организм бактерии хеликобактер развивается местный и системный ответ. Он заключается в нарастании титра иммуноглобулина IgM, IgG-, IgA-антител в сыворотке крови. В 100% случаев инфицирования обнаруживают IgG-иммуноглобулин, в 65-80% случаев – IgA, в 17-20% — IgM, поэтому точную диагностику проводят путем определения концентрации IgG в сыворотке крови.

Не требует проведения эндоскопии, поэтому метод безопасен;

Используется для профилактики первичного инфицирования.

Метод может быть не точен при определении титра иммуноглобулина у пожилых людей, так как у них понижена выработка антител, а так же у тех пациентов, кто принимает цитостатики. После терапии хелиобактериоза этот метод тоже не эффективен, потому что в крови уровень гормона после лечения антибиотиками еще 6 месяцев остается достаточно высоким.

Показания к использованию:

Жалобы пациента на диспепсию при невозможности провести эндоскопию;

Первичная диагностика хелиобактериоза;

Мониторинг эффективности лечения антибактериальными препаратами.

Референсные значения проведенного обследования: концентрация IgG-иммуноглобулина от 0 до 0,9, результат отрицательный. Это может означать отсутствие инфекции или высокую результативность терапии.

Если хеликобактер пилори положительный — что это значит?

Положительный результат теста доказывает наличие бактерии в организме, отрицательный – ее отсутствие. Не всегда положительные показатели свидетельствует о заболевании хелиобактериозом. Чаще всего – это признак наличия бактерии в организме. Однако сразу же после эрадикции Helicobacter pylori анализ на ее содержание в организме все равно будет положительным, несмотря на отсутствие бактерии – антитела в крови не исчезают быстро. Именно они дают ложноположительный результат, поэтому анализ следует брать не ранее, чем через месяц после лечения.

Это единственное исключение из правила: положительный результат на Helicobacter означает наличие заболевания или носительство бактерии.

Результаты анализа кала на хеликобактер пилори

После изучения материала, предоставленного пациентом, можно абсолютно точно ответить на вопрос, имеется ли Helicobacter pylori в его организме, или нет, то есть, анализ кала относится к качественным.

Определение антигена хеликобактер пилори в кале

Исследование выполняется методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Его точность составляет 95%, определение присутствия бактерии таким способом рекомендуется у детей, у пожилых и тяжелобольных пациентов.

Чтобы результат анализа был объективным, к исследованию нужно подготовиться:

В течение 4 недель до исследования не принимать антибиотики;

За 3 суток до исследования не есть продукты, окрашивающие кал: красное виноградное вино, свекла, виноград, черная смородина;

Читайте также:  Эндоскопия кишечника больно ли это

Перед исследованием за 2-3 дня исключить из меню продукты с грубой клетчаткой: отруби, редис, капусту, морковь, свеклу;

Не использовать лекарственные средства, усиливающие перистальтику жкт.

Для исследования достаточно заполнить на треть стандартный контейнер для сбора анализов. Нельзя брать кал из унитаза, так как он может нести на себе следы моющего средства. Желательно хранить контейнер с биоматериалом не дольше 10-12 часов при температуре от +2 до -8°C.

Helicobacter pylori IgM и IgA — что это?

Иммуноглобулины класса M – это белки крови, ранее других иммунных фракций реагирующие на появление в организме бактерии хеликобактер, их можно зафиксировать в крови на ранней стадии.

Положительный результат анализа на наличие иммуноглобулина IgM возникает при нарастании титра антител при инфицировании хелиобактериозом;

Положительные показатели содержания IgA – показатель активного процесса внедрения бактерии в слизистую оболочку желудка и ее воспаления.

У здорового человека эти показатели отсутствуют или имеются в минимальных количествах.

Информация об исследовании

Исследование используется для определения антигенов H. pylori в образцах кала методом иммунохроматографии с целью диагностики инфекции H. pylori.

Тест рекомендован многочисленными международными консенсусами, высокоинформативный метод, является ”золотым стандартом” в диагностике хеликобактериоза, используется для первичной диагностики и для контроля за проведенной антихеликобактерной терапией.

Одним из самых перспективных неинвазивных методов подтверждения хеликобактерной инфекции (являющейся в т.ч. фактором риска различных онкозаболеваний желудочно-кишечного тракта и др.) считается определение антигенов возбудителя в кале. Метод высокочувствительный и специфичный (около 90 %), малоинвазивен, прост в применении. Применение теста особенно удобно в педиатрии.

Преимущества метода:

1. Неинвазивный метод (диагностика без использования фиброгастроскопии).

2. Детекция как активных, так и кокковых форм бактерии.

3. Высокая точность, чувствительность и специфичность (до 95-98%).

4. Длительное хранение образцов без потери информативности, а так же возможность транспортировки.

5. Метод рекомендован 3-я международными (Маастрихтскими) соглашениями по диагностики и лечению хеликобактериоза, российской гастроэнтерологической ассоциацией и российской группой по изучению Helicobacter pylori как наиболее точный и удобный для пациента.

6. Используется у взрослых и детей.

7. Не требуется предварительной подготовки.

Бактерии вида Helicobаcter pylori являются причиной возникновения большинства гастритов, до 80% случаев язвенной болезни желудка и до 90% язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Считается, что во всем мире инфицировано более половины населения, а в России — более 80% жителей.

Хеликобактериоз – это широко распространенное инфекционное заболевание с оральным, фекально-оральным и контактным путем передачи возбудителя, сопровождающееся преимущественным поражением антрального отдела желудка, двенадцатиперстной кишки. Источником инфекции является больной человек или бактерионоситель, а наиболее чувствительны к ней люди с иммунодефицитами. Инкубационный период составляет около семи дней.

Возбудителем инфекции является Helicobacter pylori – спиралевидная грамотрицательная бактерия, способная инфицировать желудок и двенадцатиперстную кишку. Helicobacter pylori вызывает лишь предрасположенность к гастриту и язвенной болезни, и только при дополнительных факторах – группе крови О(I), наследственной предрасположенности, курении, злоупотреблении алкоголем, приеме ульцерогенных лекарственных препаратов, частых стрессах, неполноценном питании – возникает язвенный дефект.

В настоящее время доказано, что хеликобактерная инфекция повышает риск рака желудка. Более половины населения в мире являются носителями Helicobacter pylori, однако у большинства носителей нет никаких симптомов, и лишь примерно у 15 % из них возникает гастрит или язвенная болезнь.

Хеликобактер пилори ─ это бактерия больших размеров, которая локализуется и паразитирует под слизистой оболочкой желудка. В таких условиях она размножается и образует обширные колонии. При избыточной колонизации бактерии заселяют желчные протоки и отделы тонкого кишечника.

Анализ кала на хеликобактер ─ это один из видов диагностики, который подтверждает или опровергает наличие бактерий в организме. Его также проводят для контроля лечения. Тест кала на хеликобактер пилори ─ это неинвазивный (не требующий использования эндоскопии) метод, анализирующий биоматериал.

Чувствительность ─ это способность методики давать положительный результат. Так определяется процент выявления инфекции из общего количества проведенных тестов. Этот параметр посчитать довольно просто.

Специфичность ─ это способность диагностики не давать ложноположительных результатов при отсутствии бактерий. Этот параметр определяет процент отрицательных ответов в группе здоровых людей.

Показания к взятию кала на определение h. pylori

Важно! Язвенная болезнь
желудка и двенадцатиперстной кишки ─ абсолютный показатель для диагностики.

В каких случаях назначают делать этот анализ:

1. Заболевания, относящиеся к онкологическим или предопухолевым. Важное значение анализ имеет при лимфоме желудка, так как на ранних стадиях проводят только антибактериальное лечение без применения химиотерапии.
2. Атрофический гастрит.
3. Хронический хеликобактерный гастрит с развитием кишечной метаплазии (замещением желудочного эпителия кишечным).
4. Дисплазия желудка ─ нарушение анатомических и функциональных свойств эпителия органа.
5. Наличие семейного анамнеза рака желудка, особенно при онкологическом заболевании у родственников первой линии (родители — дети), у которых этот диагноз был доказан.
6. Болезнь Менетрие ─ хронический гастрит, для которого характерна значительная гипертрофия слизистой оболочки с последующим образованием кист и аденом. Она является предраковой патологией, поэтому возникает потребность дополнительно исследовать кал на инфекцию хеликобактер пилори.
7. Устойчивая функциональная диспепсия более шести месяцев, особенно при болях в эпигастральной области.
8. Подготовка к длительному применению нестероидных противовоспалительных препаратов, ацетилсалициловой кислоты.
9. У пациентов, которые вынуждены длительно употреблять ингибитор протонной помпы (при болезнях пищевода, для профилактики гастропатии).
10. Заболевания крови ─ тромбоцитопеническая пурпура, идиопатическая железодефицитная анемия.

Методы диагностики

Все методики диагностирования хеликобактер инфекции делятся на прямые и косвенные.

Читайте также:  Как понять что у новорожденного болит живот

Прямые направлены на выявление самой инфекции или антигенов в кале. Косвенные исследования определяют иммунную реакцию и метаболиты ─ вещества, выделяемые бактериями (уреаза).

Анализ каловых масс относится к прямым методам.

Это исследование является инновационным и самым востребованным в мировой медицине. Оно определяет h. pylori методом моноклональных антител.

Преимущества ─ низкая стоимость, высокая чувствительность и специфичность более 95%. Недостатки ─ ограниченная доступность в некоторых странах мира.

ИФА h. pylori в стуле более предпочтител
ен в лабораторной практике, чем ПЦР. Существует большое количество научных данных, на основании которых формируется этот вывод. В анализах высокие показатели чувствительности и специфичности как для первичной диагностики, так и для контроля эрадикации (режим стандартной терапии, направленный на уничтожение хеликобактер). Поэтому анализ на антиген хеликобактер пилори в кале является одним из ведущих, и его игнорировать нельзя.

Иммуноферментный анализ ─ лабораторный метод, определяющий количественное и качественное содержание бактерий в биоматериале. Он основан на специфической реакции антиген — антитело. Для него характерны:

• высокая чувствительность;
• надежность;
• быстрота.

Определение h. pylori происходит за счет того, что бактерии обладают свойствами антигена и способны вызывать в организме синтез антител.

Принцип анализа заключается в специфическом связывании антитела с антигеном. При этом один из элементов соединен с ферментом. В результате реакции с высокоспецифическим реагентом (хромогенным субстратом) образуется окрашенный продукт, количество которого определяют с помощью спектрофотометрии.

Основные стадии ИФА и определение pylori антигена:

1. Процесс идентификации тестируемых бактерий специфическим антителом. Так получают иммунный комплекс.
2. Формирование устойчивой связи бактерий с иммунным комплексом.
3. Преобразование ферментной метки в специальный регистрируемый сигнал.

Всего три стадии сделали возможным
автоматизировать анализ кала на антиген хеликобактера. Недостатками такой системы является сложность синтеза ферментных соединений и влияние хеликобактер на активность ферментов.

ИФА кала ─ это основа верификации инфекции h. pylori.

При этой диагностике проводится работа с ДНК и РНК бактерий. Это метод молекулярной биологии, суть которого заключается в многократном увеличении малых концентраций некоторых фрагментов ДНК.

Для проведения исследования используют несколько компонентов:

• праймеры ─ занимаются поиском и обозначением нужного фрагмента ДНК;
• полимераза ─ фермент, копирующий найденный участок цепи ДНК;
• DNTP ─ строительный материал для создания новой цепи;
• анализируемый образец, выделенный из биоматериала пациента;
• буферный раствор, который создает максимальные условия для реакции.

При проведении реакции специфические фрагменты ДНК накапливаются в геометрической прогрессии. Из одной молекулы получаются более 100 миллионов идентичных молекул.

Таким образом, идентифицируют генетический материал бактерий, который обнаружен даже в самых малых количествах. Если в кале есть фрагменты хеликобактер пилори, то цепочка ДНК выстроится. Если цепь не образовалась, то это значит, что результат будет отрицательным.

Преимущества:

1. Метод автоматизирован, и участие человека в процессе исследования минимальное.
2. Диагностическая ценность метода достаточно высока (до 98%).
3. В условиях современной лаборатории не дает ложноположительных результатов.

1. Отрицательный результат анализа не исключает наличия возбудителя в организме.
2. Универсальность тест-системы бывает ограничена в связи с разновидностью штаммов бактерий.
3. Результаты исследования биоматериала сложно стандартизировать. Практически невозможно выровнять количество исследуемого материала для сравнения разных образцов между собой.
4. Результаты ПЦР не могут быть окончательными и основополагающими при постановке диагноза.

Анализ на бакпосев h. pylori представляет собой сложный, трудоемкий процесс. Для выращивания живой культуры требуются специальные условия. Как правило, подобные исследования проводят в научно-исследовательских центрах или учебных заведениях, имеющих клиническую лабораторию.

Посев не является 100%-но специфичным методом. Хеликобактер часто невозможно высеять, так как сдать биологический материал правильно не всегда удается. Он может не содержать колонии культивируемого микроорганизма. Также бактерии погибают при нарушении правил сбора материала или его транспортировки.

Поэтому данный метод применять для диагностики нецелесообразно. Его используют для научных экспериментов.

Это иммунохимический метод, основ
анный на распределении исследуемого образца между неподвижной и подвижной фазой и на свойстве антител связываться с антигеном избирательным образом.

Подвижная фаза, содержащая анализируемый материал, перемещается через неподвижную. При этом многократно повторяются акты сорбции (поглощения) и десорбции (выделения). Так происходит идентификация вещества (бактерий).

• простота и удобство, метод не требует дорогостоящего оборудования;
• достоверность тестов — 99%;
• доступность (более экономичный метод в сравнении с ИФА).

К недостаткам методики можно отнести тот факт, что результат анализа зависит от качества моноклональных антител, которые используют при производстве тест-систем, а также от концентрации бактерий в биоматериале, которые не всегда могут обнаруживаться.

Правила забора материала

Чтобы итоговые показатели анализа были достоверными, нужно знать, как правильно сдавать пробу.

Биоматериал собирают в чистую сухую емкость. В нем не должно содержаться примесей мочи или крови. Оптимальный вариант, если кал собран утром, перед доставкой в лабораторию. Если такой возможности нет, то можно взять и вечернюю пробу. При этом ее нужно хранить не более 10 часов в холодильнике при температуре, не превышающей 8 °C.

Перед тем как сдавать кал, за 72 часа до исследования следует отменить прием лекарственных препаратов. При нарушении перистальтики, наличии запоров пациенту назначается мягкое слабительное (лактулозу) для предупреждения ложного результата.

Для контроля лечения инфекции h. pylori анализ кала проводят не раньше чем через месяц после окончания антибактериальной терапии.